Bioero.com

Salud, Biomedicina y Biotecnología al día



Categorias



Archivos para la categoria'Biotecnología'

Genes vs masa corporal

Author: Bioero
09.02.2008
Tags: 
  • Investigación efectuada en ratones genéticamente manipulados llega a la conclusión que hay muchísimos genes implicados en el sobrepeso. Se estima que aproximadamente 6.000 genes tienen un papel importante en el control de la masa corporal.
20.11.2007
Tags: 
Tags: 
  • Los efectos negativos de carga metabólica que suele acarrear la introducción así como la expresión de ADN foráneo en la célula hospedadora puede deberse a varios factores:
Tags: 
  • Muchos vectores derivan de plásmidos de control relajado. Los derivados de ColE1 tienen entre 15 a 60 copias. Para el caso de la serie pUC ésta llega a presentar varios cientos de copias por célula y los derivados p15A tienen aproximadamente unas 15 copias. En ausencia de presión selectiva se pierden plásmido en cada ciclo celular como resultado de multimerización. Sin embargo cuando se clonan genes cuyos productos son tóxicos u originan una gran carga metabólica para la célula húesped, o cuando las mismas se cultivan en fermentaciones en continuo a altas densidades las pérdidas suelen ser mucho mayores.
    El uso de antibióticos para mantener la presión selectiva presenta ciertas desventajas, entre ellas, la contaminación del producto o la biomasa con el antibiótico. Para evitar estos efectos no deseados, se han diseñado algunas alternativas, como el uso de plásmidos que ocasionan la muerte celular cuando los mismos son eliminados de la célula. Sin embargo, este tipo de contrucciones génicas tienen el inconveniente de que introducen restricciones en el diseño de los medios de cultivo junto con una carga metabólica adicional. Por tal motivo, para evitar tales desventajas se ha diseñado otro sistema con las siguientes características:

Tags: 
  • Cada proteína tiene una vida media diferente. Esta vida media dentro de la célula puede ser de unos pocos minutos a varias horas. La presencia de puentes disulfuro, puede aumentar la estabilidad proteica. También la presencia de ciertos aminoácidos en el extremo N-terminal de la proteína pueden contribuir a tal estabilidad.
Tags: 
  • Como es sabido, no todos los ARN mensajero (ARNm) se traducen (proceso molecular en donde se produce proteína a partir de la secuencia de ARNm, previamente transcripto de la secuencia de ADN que contiene el gen) con la misma eficiencia. Uno de los factores que condicionan esta eficacia es la presencia al comienzo del ARNm de una secuencia de 6 a 8 bases que se puede unir con otra secuencia complementaria situada en el extremo 3’ del ARN ribosómico (ARNr) 16S. De este modo, el ARNm para que sea traducido debe tener este sitio de unión al ribosoma, conocido como secuencia de Shine-Dalgarno. Esta secuencia es básicamente la siguiente: 5’-UAAGGAGG-3’. En tal sentido, muchos vectores de expresión en la bacteria Escherichia coli se han diseñado para dotar al gen clonado de esta secuencia, con el objetivo de que su ARNm sea traducido en forma eficiente.
Tags: 
  • Cuando se desea expresar genes en huéspedes heterólogos es frecuente encontrarse con el hecho de que la proteína recombinante se degrade, con lo que se obtiene bajo rendimiento de proteína en adecuadas condiciones. Una de las maneras de solucionar este problema, consiste en lograr proteínas híbridas, o sea fusionadas junto con la proteína heteróloga de interés. Esta unión es covalente, de modo que sea estable que no sea “atacada” por proteasas del húesped.
Tags: 
  • Muchos de los sistemas para la expresión de proteínas usadas a escala de laboratorio para uso en investigación resultan ser caros y complicados para su uso a nivel industrial.
Tags: 
  • Como tendencia general, en principio, se podría pensar que si quisiera expresar un gen con alto rendimiento de producción se debería escoger un promotor fuerte y constitutivo. Sin embargo, la mayoría de las veces, este tipo de promotores no aporta el efecto deseado debido a que al estar expresándose permanentemente el gen de interés a alto nivel, pueden sustraerse recursos para el normal crecimiento de las células. Esto es especialmente importante si la proteína foránea tiene efectos negativos para el huéped. Por lo tanto, lo recomendable es emplear promotores regulables, que el investigador puede “conectar y desconectar” a voluntad.
Tags: 
  • Debido a que la clonación directa, o sea sin manipulación adicional de un gen en un vector normal sin modificación molecular, tal como el plásmido pBR322, no suele asegurar que el gen de interés se vaya a expresar correctamente ni en concentración adecuada, en particular cuando se procede a clonar genes de especies alejadas filogenéticamente, deben considerarse algunas características para el diseño de vectores adecuados. A grandes rasgos debe tenerse en cuenta: